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基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)/唾液檢查

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臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)

臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)目錄

唾液(saliva )是腮腺、頜下腺舌下腺和散在小唾液腺的分泌液。其分泌受神經(jīng)反射的調(diào)節(jié)。唾液成分中水占99%以上;固體成分占約0.7%,其中有機(jī)物約占0.5%,無機(jī)物約占0.2% ,此外,還有少量白細(xì)胞、上皮細(xì)胞來自口腔粘膜唾液腺、痕量作物以及口腔中的微生物。

影響唾液腺分泌的因素很多,諸如口腔內(nèi)的理化刺激、機(jī)體對水的攝入量、情緒變化、環(huán)境因素、藥物以及采集唾液的方法和時間等都全影響唾液的分泌速度和成分。因此唾液成分不夠恒定。進(jìn)行唾液分析必須嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,尤其是標(biāo)本采集方法和時間,否則。實(shí)驗(yàn)結(jié)果無可比性。

唾液的主要生理功能是消化淀粉。唾液中的溶菌酶,乳過氧化物酶(lactoperpxidase)、乳鐵蛋白免疫蛋白等具有抵御微生物感染的作用。此外唾液還有潤間濕口腔粘膜和齒面。緩沖酸堿反應(yīng),保護(hù)口腔粘膜和齒面免受酸堿浸濁的作用。

唾液中不僅含有內(nèi)源物質(zhì)唾液腺合成的物質(zhì)和來自血液的物質(zhì),還可含有一些外源物質(zhì),如微生物,藥物和毒物。故唾液除用于口腔內(nèi)環(huán)境和唾液腺功能檢查外,尚可用于某些全身性、代謝性疾病的實(shí)驗(yàn)診斷以及藥物的監(jiān)測、藥物中毒的急診檢驗(yàn)等。因?yàn)橥僖簶?biāo)本易于集且無損害,故該項(xiàng)檢驗(yàn)日益受到重視。

一、標(biāo)本采集

(一)混合性唾液

混合性唾液較易采集,但不能肥映單個腺體的狀況?;旌贤僖褐饕獊碜匀俸偷氏孪伲m用于評價口腔內(nèi)環(huán)境。采集時間最好限定于午后2-4小時,讓受檢者自行收集或由醫(yī)務(wù)人員幫助采集。采集時先用清水漱口,靜息5-10分鐘,棄去最初分泌物的唾液,將繼續(xù)分泌的唾洗衣機(jī)收集于潔凈的小杯內(nèi)。至少2毫升。若液量不足,可囑其做口舌運(yùn)動,促進(jìn)分泌。也可于舌下放一小塊洗凈、滅菌、干燥的脫脂紗布以吸收呼唾液,10min后取出,擠出唾液備用。

(二)單一腺體唾液

1.腮腺唾液:由口腔科醫(yī)師采集,分導(dǎo)管法和吸盤法。

2.頜下腺唾液:較難采集,?;烊肷嘞孪僖?。Mandel采用塑料吸盤法。鼗吸盤固定于舌下腺區(qū)收集唾液。

唾液標(biāo)本收集后應(yīng)立即送檢。室溫下放置后PH上升,細(xì)菌繁殖,析出沉淀,化學(xué)成分發(fā)生變化。一般性狀檢查和微生物學(xué)必須使用新鮮的標(biāo)本。

二、一般性狀檢查

(一)量

正常人成人每日唾液分泌量為1-1.5l 。通常只測定15 分鐘的分泌量,然后計算出單位時間的唾液分泌量,即唾液分泌速度或稱唾液流量。

[參考值] 成人腮腺靜止性唾液流量0.3-2.5ml/15min(0.02-0.17ml/min);刺激性唾液流量(檸檬酸刺激法)0.5-10ml/15min(0.3-0.67ml/min)。

[臨床意義]

1.生理性變化:唾液流量受多種因素影響,個體間的差異也較大。老年人唾液流量低于青年人,兒童期流量較高,妊娠期明顯高于孕前。

2.病理性變化①流量增高:見于流涎癥、某些神經(jīng)、精神性疾病癔病,胃腸疾病如胃和十二指腸潰瘍,口腔病如口頰炎及某些藥物反應(yīng)如使用毛果蕓香堿時等;②流量減低:全唾液流量為0.2-0.9ml/15min時為唾液分泌減少;如為0.2ml/15min稱口干癥,見于唾液腺急、慢性炎癥、涎石病涎石阻塞腺導(dǎo)管時,舍格倫綜合征脫水,以及服用顛茄、阿托品、甲基多巴等藥物時。

(二)顏色和透明度

正常唾液無色透明,可含泡沫。在唾液腺和口腔疾病時可呈不同顏色和混濁。紅色混濁見于唾液腺和口腔出血。灰白色、淺黃色或綠色混濁銅綠假單脫菌感染見于上述器官的急、慢性炎癥。

(三)粘度

唾液中含粘蛋白和其他有機(jī)物,正常時略帶粘性。當(dāng)唾液腺和口腔發(fā)生細(xì)菌感染時粘度增高;唾液朱導(dǎo)管發(fā)炎進(jìn)可自然排出或經(jīng)擠壓后排出膿性、蛋清樣或膠胨狀粘稠液體,多見于慢性阻塞性腮腺炎

(四)涎石

涎石(sialolith)是唾液導(dǎo)管內(nèi)或腺體內(nèi)形成的結(jié)石。以頜下腺結(jié)石發(fā)病率最高,占涎石病例83%,可于唾液中檢出。

三、化學(xué)檢查

(一)pH

正常唾液PH介于5.6-7.6。在口腔清潔度下降或唾液腺和口腔有細(xì)菌感染時,這些微生物可分解糖類產(chǎn)生有機(jī)酸,使唾液PH下降,齒表的蛋白保護(hù)膜受損,進(jìn)而破壞牙釉質(zhì),易形成齠齒。

(二)隱血

正常唾液隱血試驗(yàn)陰性。當(dāng)唾液腺或口腔器官因炎癥惡性腫瘤、結(jié)石或其它疾病而至出血時,鏡檢可見紅細(xì)胞,若紅細(xì)胞已破壞,可作隱血試驗(yàn)證實(shí)。

(三)非蛋白氮類物質(zhì)

血漿中的尿素,肌酐尿酸可通過唾液腺細(xì)胞進(jìn)入唾液,在唾液中的濃度與血漿中濃度相關(guān)。測定以上物質(zhì)在唾液中含量的臨床意義與血液相同。

[參考值] 成人靜止性唾液:尿素4.2±0.65mmol/L;肌酐39.8±7.1μmol/L;尿酸0.82±0.43mmol/L。

(四)激素

Shannon等研究結(jié)果表明,脂溶性非結(jié)合類固醇容易通過微循環(huán)和唾液細(xì)胞時入唾液,其濃度與血漿中的非結(jié)合類固醇濃度相關(guān)。如皮質(zhì)醇、醛固酮、脫氫雄甾醇、睪酮、孕酮雌二醇、雌三醇等無可通過唾液測 定,用于評價腎上腺皮質(zhì)功能和生殖醫(yī)學(xué)研究。

(五)酶類

1.淀粉酶(amylase)唾液中的淀粉酶主要由腮腺合成和分泌。正常人唾液中該酶活性很高,約為血清淀粉酶活性的105倍。唾液淀粉酶活性能反映腮腺的分泌功能。當(dāng)腮腺實(shí)質(zhì)因感染,惡性腫瘤等原因被破壞以及腺泡萎縮或發(fā)育不全而致功能缺損時,α-淀粉酶的合成和分泌減少,唾液淀粉活性減低。

2.溶菌酶(lysozyme)溶菌酶是由單鏈多肽組成的堿性蛋白質(zhì),分子量1.5萬,等電點(diǎn)PH11 ,易與細(xì)菌結(jié)合,可水解革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁粘肽,是體液中重要的殺菌物質(zhì),生理性減低見于婦女月經(jīng)期,病進(jìn)性減低見于惡性腫瘤,唾液溶核輻射酶尊低易致口腔感染。

(六)電解質(zhì)

影響唾液電解質(zhì)濃度的因素較多。一日內(nèi)各種電解質(zhì)的變化有一定的規(guī)律性,故每次測定采集標(biāo)本的時間應(yīng)一致以便作動態(tài)觀察。

[參考值] 成人唾液電解質(zhì)參考值見表14-1。

表14-1 唾液電解質(zhì)參考值(mmol/L)

靜止性唾液 刺激性唾液
腮腺 頜下腺 混合性 腮腺 頜下腺 混合性
鈉 1-10 -6.5-21.7 20-60 21 43-46
鉀 20-50 -19-23 10-30 17 18-19
Na/K -->0.5-<1 ---
鈣 0.2-2.5 -1.43 ±3.4 --2.2-2.6
鎂 --0.24±0.15 --00.08-0.53
氯 --10-20 23 20 20-40
磷酸鹽堿 --5.08±1.25 ---

[臨床意義] ①唾液鈉、氯增高見于腮腺炎、唾液囊性纖維性變,Sjogren綜合征、頭頸部腫瘤放射治療后及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等;減低見于充血性心力衰竭腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)。②唾液鉀增高,見于原發(fā)性醛固酮增多癥洋地黃中毒等。③唾液鈣增高見于唾液腺囊性纖維性變。

(七)蛋白質(zhì)

唾液中的蛋白質(zhì)以粘蛋白為主,其它蛋白質(zhì)含量較低。迄今已發(fā)現(xiàn)十余種唾液蛋白質(zhì)和酶作為遺傳標(biāo)記物,對人類遺傳學(xué)和法醫(yī)學(xué)研究具有一定意義。

1.白蛋白:正常成人唾液中白蛋白濃度很低。當(dāng)唾液腺患炎癥、腫瘤等時,血液唾液屏障破壞,血漿白蛋白進(jìn)入唾液,白蛋白增高。Sjogren綜合征患者唾液白蛋白增高與腺體破壞程度呈正相關(guān)。

2.甲種胎兒蛋白:唾液中AFP參考值為14.3±4.9ng/L。肝癌時增高,且與血清AFP顯著相關(guān)。

(八)治療藥物和毒物測定

1.治療藥物監(jiān)測:血漿中游離型藥物可進(jìn)入唾液。研究結(jié)果證明,許多藥物在唾液與血漿中的濃度之比值同血漿中游離型藥物濃度與其總濃度的比值近似,說明唾液中的藥物濃度與血漿中的游離型藥物濃度大體一致(表14-2)。因此唾液藥物濃度測定可在一定程度上反映血漿中的藥物濃度治療藥物的監(jiān)測和藥物代謝動力學(xué)研究提供了方便條件。

表14-2 唾液-血漿藥物濃度比值與血漿游離型藥物比率的關(guān)系

治療藥物 藥物濃度比值(唾液/血漿) 血漿游離型藥物比率(游離型濃度/總濃度)
中文西平 英文名稱
卡馬西平 Carbamazepine 0.37 0.24-0.33
地高辛 Digoxin 0.78 0.77
苯妥英鈉 Phenytoin 0.09-0.11 0.10-0.14
撲米酮 Primidone 0.97-1.08 0.78-0.97
茶堿 Theophyllime 0.52 0.41
苯巴比妥 Phenobarbital 0.30-0.38 0.40-0.68
水楊酸 Salicylic acid 0.30-0.40 0.20-0.55
甲苯磺丁脲 Tolbutamide 0.012 0.09
lithium 2.20-2.30 1.90

2.毒物分析:唾液可用于分析毒,尤其是外源性的,例如:第一是汞:進(jìn)入體內(nèi)的汞能部分排入唾液,且與血漿濃度呈正相關(guān),因此唾液汞含量測定可用于汞中毒的診斷及對汞作業(yè)者的職業(yè)病調(diào)查。二是乙醇:飲酒后乙醇很快被吸收進(jìn)入血漿,繼而從唾液排出唾液中乙醇濃度略高于血漿中濃度。測定唾液中的乙醇濃度對急性乙醇中毒的診斷與搶救具有實(shí)用的價值。

四、顯微鏡檢查

(一)細(xì)胞

正常唾液中無紅細(xì)胞,可見少量的鱗狀的上皮細(xì)胞和白細(xì)胞。后者主要是單核吞噬細(xì)胞,多數(shù)胞質(zhì)內(nèi)含有吞噬的細(xì)菌。白細(xì)胞計數(shù)可達(dá)0.54×109/l 。口咽部和唾液感染,結(jié)石或患惡性腫瘤時,唾液中白細(xì)胞增多??谘什炕蛲僖合俪鲅獣r,唾液內(nèi)可檢出紅細(xì)胞。以唾液沉淀物涂片進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查,有助于炎癥和腫瘤的診斷,唾液中檢出癌細(xì)胞診斷口腔器官和唾液腺惡性腫瘤的有力證據(jù)。

(二)結(jié)晶體

根尖囊腫患者的唾液淀物中有時可檢出膽固醇結(jié)晶和透明小體。后者為細(xì)小線粒狀或弧形小體。

五、免疫學(xué)檢查

(一)免疫球蛋白

唾液中的免疫球蛋白主要是SIGa 和IGG??捎肦IA和單向擴(kuò)散法測定。靜止性唾液中IG含量常高于刺激性唾液。

[參考值] 成人靜止性唾液SIGA:132.8 ±70.2mg/L;IGG:127.9 ±42.9mg/L。

[臨床意義] 兒童唾液的SIGA和IGg 含量明顯低于成人,隨年齡的遞增,16歲后接近成有水平。亦有文獻(xiàn)記載于7-9歲SIGa 達(dá)到成有水平。

1.IG增高:①唾液腺的炎癥、惡性腫瘤等可破壞血液-唾液屏障,使血液中的IG進(jìn)入唾液,使IGA,IGG,IGM均可增高。②某些病毒感染如麻疹早期,可以唾液中檢出特異性SIGA型抗體,有助于診斷。③Sjogren綜合征屬自身免疫性疾病,主要侵犯外分泌腺使唾液中SIGA增高。

2.IG減低:病理性唾液IG減低見于原發(fā)性或免疫缺乏病如先天性丙種球蛋白缺乏癥、原發(fā)性選擇性IGA缺乏癥、應(yīng)用免疫抑制劑放射治療時,齒患兒及大量吸煙者IGA也可能降低。

(二)病毒抗原和抗體

1.肝炎抗原和抗體唾液中HBSAG檢查結(jié)果因采集唾液的部位而異以頰齦之間收集的唾液陽性率最高,有人用ELISA法檢查29例血清HBSAG陽性患者唾液中HBSAG及51例甲型肝炎患者唾液中IGM型抗HAV,結(jié)果唾液中陽性率均為100%。說明唾液標(biāo)本有助于進(jìn)行甲型與乙型肝炎的實(shí)驗(yàn)檢查。

2.HIV抗體唾液HIV抗體檢查對AIDS具有診斷意義,適用于采血困難的患者的及細(xì)胞同型的血型物質(zhì),可用于以進(jìn)行血型鑒定。

六、微生物學(xué)檢查

(一)齲齒活動性試驗(yàn)

齲齒的形成與口腔環(huán)境的密切關(guān)系。唾液中的細(xì)菌可分解口腔內(nèi)的糖類產(chǎn)生的機(jī)酸,破壞牙齒結(jié)構(gòu),促進(jìn)齲齒形成。通常將對促進(jìn)齲齒形成的各種因素的檢查稱齲齒活動性試驗(yàn)。常用的試驗(yàn)有乳酸桿菌計數(shù)培養(yǎng)和發(fā)酵試驗(yàn)。

1.乳酸桿菌計數(shù)培養(yǎng):唾液中乳酸桿菌的多少直接關(guān)系到唾液中的機(jī)酸的產(chǎn)量和齲齒形成的可能性。唾液桿菌計數(shù)培養(yǎng)可反映齲齒的活動性。于早飯前以無菌操作技術(shù)采集2毫升唾液,稀釋后定量接種于專用培養(yǎng)基中培養(yǎng)后進(jìn)行菌落計數(shù)。算出每毫升唾液的含菌數(shù)。唾液中乳酸桿菌含量與齲齒活動性的關(guān)系見表14-3。

表14-3 唾液乳酸桿核輻射含量與齲齒活動性的關(guān)系

菌數(shù)/ml 齲齒活動性
0 陽性
1-1000 可疑
1000-5000 弱陽性
5001-10000 陽性
> 10000 強(qiáng)陽性

2.發(fā)酵試驗(yàn):主要檢查唾液中乳酸桿菌對葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)酸的能力,較上術(shù)這試驗(yàn)簡易。發(fā)酵試驗(yàn)陽性,說明被檢者的齲齒活動性高于正常人。

(二)微生物與寄生蟲學(xué)檢查

引起的口腔和唾液腺感染的細(xì)菌和真菌均可于唾液中檢出,可將唾液的離心沉淀物涂片進(jìn)行革蘭氏染色抗酸染色等,欲得到確切的病原學(xué)診斷論據(jù),尚須進(jìn)行培養(yǎng)鑒定。急性壞死潰瘍性齦炎咽峽炎患者的唾液可檢出梭狀桿菌和文森螺旋體,鵝口瘡患者唾液中可檢出白色假絲酵母孢子,唾液沉淀物中的白色絮狀物涂片陽性檢出率更高。病毒性腮腺炎和口腔炎患者的唾液中可進(jìn)行病毒檢查。

阿米巴齒齦齒槽膿腫時,阿米巴滋養(yǎng)體右經(jīng)瘺道進(jìn)唾液而被查出,。寄生齒垢或齲齒的毛滴蟲滋養(yǎng)體也可于唾液壓或膿汁中查出

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