基礎檢驗學/尿液血紅蛋白、肌紅蛋白及其代謝產(chǎn)物的檢查
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(一)血紅蛋白尿(hemoglobinutia)的檢查
正常人血漿中含有50mg/L游離血紅蛋白,尿中無游離HB,當有血管內(nèi)溶血,血中游離HB急劇上升超過肝珠蛋白的結(jié)合能力(正常情況下最大結(jié)合力為1.5g/L血漿)即可排入中,可通過尿游離HB的試驗(尿隱血試驗)檢出。
[方法學評價] 過HB尿檢測采用的原理是與便隱血檢查相同的化學法,如鄰甲苯胺法、匹拉法洞法等,現(xiàn)被度帶法所取代,這兩種方法除與HB反應外,也與完整的紅細胞反應(敏感度為紅細胞達5-10μl),故要注意尿沉渣中紅細胞對結(jié)果的影響。此外尿路感染時某些細菌產(chǎn)生過氧化物酶可致假陽性,大劑量的維生素C或其它救災原物質(zhì)可導致假陰性。目前新發(fā)展起來的HB單克隆抗體免疫檢測法克服以上缺點。
[參考值] 定性試驗陰性
[臨床意義] ①隱血陽性可見于各種引起血管內(nèi)溶血的疾病,如6-磷酸葡萄糖脫氫酶缺乏在食蠶豆或用藥物伯氨喹啉、磺胺、非那西丁時所能上能下起的溶血;②血型不合引起急性溶、陣發(fā)性寒冷性或睡眠性Hb 尿癥,③重度燒傷、毒蕈中毒、毒蛇咬傷;④自身免疫性溶血性貧血、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。
(二)肌紅蛋白尿的檢查
肌紅蛋白是橫紋肌、心肌細胞內(nèi)的一種含亞鐵血紅素的蛋白質(zhì)其結(jié)構及特性與血紅蛋白相似,但僅有一條肽鏈,分子量為1.6-1.7萬。當有肌損傷時,肌紅蛋折釋放進入血循環(huán),因分子量較小,易通過腎小球濾過,而排入尿中。
[方法學評價]因MB分子中含血紅素基團,也具有類似過氧化物酶樣活性,故以往經(jīng)常采用與血紅蛋白相同的化學法檢查。而這些方法對Mb 與HB并存時不能區(qū)別,可利用政權鐵HB與政權鐵MB的氧化物在580-600nm處吸收光譜完全不同的特點加以區(qū)別,但靈感度不夠。目前多采用肌紅蛋白的單克隆抗體進行酶聯(lián)免疫吸附或放射免疫法,敏感性、特異性均較好。
[參考值] 定性反應:陰性。定量:<4mg/L
[臨床意義] MB尿多發(fā)生于有肌損傷時,例如:①陣發(fā)性肌紅蛋白尿:肌肉痛性痙攣發(fā)作后72小時,尿中出現(xiàn)MB;②創(chuàng)傷:擠壓綜合征、子彈傷、燒傷、電擊傷、手術創(chuàng)傷等;③組織局部缺血如心肌梗死早期、動脈阻塞缺血;④休謝性肌紅蛋白尿酒巴精中毒,砷化氫、一氧化碳中毒,巴比妥中毒、肌糖原積累等;⑤原發(fā)性(遺傳性)肌疾病如皮膚肌炎、多發(fā)性肌炎、肌肉營養(yǎng)不良等;⑥過度劇烈運動或長期行軍尿中排出MB,即行軍性MB尿。
(三)含鐵血黃素尿的檢查
含鐵血黃素尿(hemosiderinuria,Hd)為尿中含有的暗黃色不隱定的鐵蛋白聚合體,是含鐵的棕色色素。當血管內(nèi)溶血時,在部分HB在尿中排出,而有一部分HB被腎小管上皮細胞重吸收,并在細胞內(nèi)分解成含鐵血黃素,隨細胞脫落由尿中排出。當細胞分解時含鐵血黃素釋放到尿中,可用鐵染色檢出。
[臨床意義] 尿中出現(xiàn)含鐵血黃素意義與血紅蛋白類似,如慢性血管內(nèi)溶血、陣發(fā)性睡眠性HB尿癥和行軍性肌紅蛋白尿、自身免疫溶血性貧血、嚴重肌肉疾病等。有時如因尿中HB量少,隱血試驗陰性時可進一步檢測是否有含鐵血黃素。另外在溶血初期雖有HB尿。但因HB尚未被腎上皮細胞攝取,因而未形成含鐵血黃素,所經(jīng)本試驗右呈陰性。
(四)卟啉尿的檢查
卟啉(porphyrin)是血紅素生物合成的中間體,為構成動物血紅蛋白、肌紅蛋白、過氧化氫酶、細胞色素等的重要成分。以四個吡咯環(huán)聯(lián)結(jié)為基本化學結(jié)構。有兩種同分異構體,即尿卟跑龍?zhí)住?a href="/w/%E7%B2%AA%E5%8D%9F%E5%95%89" title="糞卟啉">糞卟啉兩型,卟啉尿指尿中排出過多的卟啉或其前體物如δ-氨基γ-酮戊酸及卟膽原。
[方法學評價] 卟啉定性過篩法可用Ekhrlich醛試劑或酸性有機溶劑抽提后用紫外線照射觀察熒光的方法(可檢出200μg/L尿),還可用分光光度或熒光測定,薄層層析或高將近液相色譜法對尿中卟啉成人進行定量分析。
[參考值] 卟啉定性:陰性。
定量分析:
(1)ALA:兒童38.2μmol/L;成人11.4-57.2μmol/24h
(2)CP兒童:0-12.nmol/24h;成人75-240nmol/24h
(3)PBG:0-4.4μmol/24h
(4)UR:0-36nmol/24h
[臨床意義]卟啉病是一類先天性或獲昨性卟啉代謝紊亂的疾病,其中的代謝產(chǎn)物UR、CP、ALA、PBG大量則由尿、便中排出,并出現(xiàn)皮膚、內(nèi)臟、精神和神經(jīng)癥狀。此外卟啉尿還見于鉛信其客觀存在金屬中毒、肝病和某些溶血性貧血。尿中卟啉成分的定量檢查有兵團于各型卟啉病之間的鑒別。(表6-2)
表6-2 尿中卟啉類及前身化體物與疾病的關系
疾病 | ALA | PBG | CP | UR |
先天性紅細胞生成性卟啉病 | 正常 | 正常 | ↑ | ↑↑ |
急性間歇性卟啉病(急性發(fā)作) | ↑↑ | ↑↑ | ↑ | 正?;颉?/td> |
混合性卟啉?。裕?/td> | 正常 | 正常 | 正常或↑ | 正?;颉?/td> |
混合性卟啉?。毙裕?/td> | ↑↑ | ↑↑ | ↑ | ↑ |
遺傳性卟啉?。毙裕?/td> | 正?;颉?/td> | 正?;颉?/td> | ↑ | 正常 |
鉛中毒 | ↑↑ | 正常或輕度↑ | ↑↑ | 正?;蜉p度↑ |
癥狀性卟啉病 | 正常 | 正常 | ↑ | ↑↑ |
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